Coltura batterica delle urine. Metodo di ricerca batteriologica

Una gravidanza tanto attesa è una grande gioia per una donna. Naturalmente, la futura mamma vuole che il suo bambino nasca sano. Per fare questo, una donna si registra presso una clinica prenatale. Qui viene regolarmente visitata e le vengono prescritti gli esami necessari.

Sfortunatamente, molte malattie vengono trasmesse da madre a figlio durante l’utero. Pertanto, una donna incinta deve prendersi cura attentamente della propria salute e seguire tutte le istruzioni del ginecologo.

È stato accertato che circa il 45% delle morti neonatali sono causate da infezioni intrauterine.

Il bambino lo riceve dalla madre, che non sa che c'è un'infezione nel suo corpo o non riceve cure adeguate. Un ruolo speciale è dato alle infezioni del sistema genito-urinario, poiché spesso sono asintomatiche. Ad esempio, se la madre soffre di uretrite, quando passa attraverso il canale del parto infetto, il bambino potrebbe già nascere con polmonite o congiuntivite.

La coltura batteriologica delle urine aiuterà a identificare queste malattie, che incluso nell'elenco degli studi obbligatori per una donna incinta.

Cos'è?

L'urinocoltura batteriologica è uno studio che permette di individuare la presenza di flora patogena nelle urine e, di conseguenza, la malattia stessa. Questa analisi consente di diagnosticare malattie del sistema genito-urinario. Gli organi della madre e del bambino sono strettamente interconnessi da vasi sanguigni e linfatici, quindi l'infezione “cammina” avanti e indietro, bilanciandosi tra questi due sistemi.

La coltura batterica consente non solo di identificare l'agente patogeno, ma anche di stabilirne il tipo, nonché di determinarne la sensibilità agli antibiotici al fine di prescrivere un trattamento efficace.

Questo studio può determinare la presenza di tali microrganismi:

• coli;
• Pseudomonas aeruginosa – causa infezioni purulente. Caratterizzato da una maggiore resistenza agli antibiotici;
• stafilococco Il suo habitat preferito è la mucosa degli organi genitali. Provoca malattie delle vie urinarie;
• streptococco;
• Trichomonas;

• gardnerella;
• gonococco;
• Proteo;
• citrobatterio;
• leptotrix;
• Klebsiella – provoca cistite e pielonefrite;

Quando dovrei prenderlo?

L'insidiosità di un'infezione del tratto genito-urinario sta nel fatto che potrebbero non esserci segni della malattia, ma l'agente patogeno è già presente nei test. Cioè, la malattia ha un decorso nascosto. La batteriemia nascosta è confermata dai seguenti indicatori:

• dopo aver eseguito l'analisi per due volte rispettando la tecnica di esecuzione, viene seminato 1 tipo di patogeno;
• CFU – più di 105;
• se l'urina è stata raccolta con un catetere, le CFU sono 102.

A questo proposito, a tutte le donne incinte viene prescritto di sottoporsi a test batteriologici sulle urine due volte durante la gravidanza - al momento della registrazione e al 9 mese di gravidanza. Questa è una misura preventiva per non perdere lo sviluppo della malattia. A volte capita che i processi nascosti nel corpo di una donna incinta non si riflettano in un test generale delle urine. E solo la cultura può svelarli.

Se la forma latente non viene rilevata in tempo, si svilupperà in una malattia conclamata con gravi conseguenze sia per la madre che per il feto.

Viene effettuata un'analisi non programmata se:

• un esame generale delle urine ha mostrato la presenza di leucociti e proteine;
• una donna ha il diabete;
• per l'infezione da HIV;
• c'è minzione dolorosa;
• aumento della temperatura corporea;

• dolore al basso ventre;
• mal di schiena lombare;
• sensazione di urina residua nella vescica dopo averla svuotata;
• controllare il trattamento effettuato;
• la presenza di patologie nel sistema genito-urinario della donna prima della gravidanza.

È obbligatorio sottoporre l'urina alla coltura batterica durante la fecondazione in vitro.

Durante la gravidanza, le malattie del sistema genito-urinario si verificano abbastanza spesso. A ciò contribuiscono i seguenti fattori:

• variabilità dei livelli ormonali. Allo stesso tempo, possono “fiorire” varie infezioni;
• diminuzione delle proprietà immunitarie del corpo;
• l'utero allargato esercita pressione sull'uretere e perde il tono;
• L'utero in stato di gravidanza assorbe parte del flusso sanguigno, il che riduce la circolazione sanguigna nella vescica.

Tutto ciò provoca il ristagno del sistema urinario. I batteri provenienti dai genitali esterni viaggiano attraverso il tratto ascendente fino ai reni, aumentando il rischio di sviluppare pielonefrite.

La pielonefrite è una malattia estremamente grave che è pericolosa per una donna incinta. Si manifesta con febbre alta, dolore acuto alla parte bassa della schiena e porta all'intossicazione dell'intero corpo. Per la madre, la pielonefrite non trattata minaccia l'insufficienza renale e il parto prematuro.

I batteri e le loro tossine entrano nel feto attraverso la placenta e possono provocarne la morte nel grembo materno. Se un bambino del genere nasce comunque, gli viene diagnosticata un'infezione intrauterina, danni agli organi interni e difetti dello sviluppo.

Oltre alla pielonefrite, è possibile lo sviluppo della cistite. Questa è un'infiammazione della parete della vescica. In questo caso compaiono minzione frequente e dolorosa e una sensazione di pressione nell'addome inferiore. Può causare un'infezione renale e causare un parto prematuro.

L'uretrite è l'infiammazione dell'uretra. In una fase iniziale, la malattia può essere rilevata solo tramite test. In futuro, si manifesta con minzione dolorosa, gonfiore delle labbra e presenza di secrezioni.

Tutte queste malattie possono essere determinate mediante analisi batteriologica delle urine.

Come raccogliere correttamente il materiale per la ricerca?

Affinché l'analisi sia veramente informativa, è necessario raccogliere correttamente l'urina. Per fare ciò, seguire le istruzioni:

• 2 giorni prima dell'esame, interrompere l'assunzione di cibi grassi e salati, nonché di diuretici. Non è consigliabile posizionare le candele. Evitare di mangiare cibi contenenti coloranti: barbabietole o carote;
• Viene analizzata solo l'urina del mattino;
• Non raccogliere il biomateriale da una sacca per l'urina o da una padella. Il contenitore deve essere sterile. È meglio acquistare in farmacia un contenitore speciale;

• Prima di sostenere il test, i genitali esterni vengono lavati;
• dovrebbe essere raccolta una porzione media di urina. A tale scopo, la prima porzione viene versata nella toilette, la porzione centrale in un contenitore e l'ultima porzione viene nuovamente versata nella toilette. La procedura va eseguita con attenzione, senza toccare le pareti interne del contenitore con le dita e la pelle;
• Per lo studio sono necessari almeno 60 ml di liquido. Dopo aver raccolto il materiale, il serbatoio viene chiuso ermeticamente e non viene più aperto;
• l'urina deve essere inviata al laboratorio entro 2 ore. Sebbene possa essere conservato in frigorifero per 8 ore;
• la coltura deve essere eseguita prima di iniziare la terapia antibiotica.

L'urina può anche essere raccolta utilizzando un catetere. Ma questo metodo non è sempre appropriato poiché può contribuire alla diffusione dell’infezione. In rari casi, viene eseguita una puntura della vescica. La regola più importante quando si raccoglie l'urina per l'esame batteriologico è il mantenimento della sterilità e la pronta consegna del materiale al laboratorio.

Dopo aver ricevuto il barattolo, l'assistente di laboratorio inizia immediatamente a esaminarne il contenuto. Ciò non dovrebbe essere ritardato, poiché aumenta il rischio che si sviluppino batteri nel materiale, che vi entrano dall'ambiente esterno, e in questo caso il risultato sarà falso.

Il ricercatore mette alcune gocce di urina sul mezzo nutritivo. Di solito si usa sabouraud o agar. Quindi i media vengono posti in un termostato. Poiché lo scopo dello studio è coltivare e vedere i batteri, se sono nelle urine, dovrebbero essere create condizioni ottimali per questo. Il termostato è il posto migliore. Mantiene esattamente la temperatura alla quale crescono i microrganismi.

Il tempo necessario per condurre la ricerca è è di 5-7 giorni. Questo è il periodo ottimale per la crescita batterica.

Trascorso il tempo, i fluidi vengono rimossi dal termostato e il risultato viene valutato.

Decodificare i risultati

Va notato che normalmente una certa quantità di batteri può essere seminata nelle urine, ad esempio Staphylococcus aureus o Escherichia coli, ma non devono superare un certo titolo.

Il risultato viene valutato da un batteriologo. Il valore numerabile è l'unità formante colonie - CFU. La valutazione è questa:

• se l'indicatore è inferiore a 1000 CFU l'esito è negativo;
• da 1000 CFU a 10000 CFU - dubbi. L'analisi viene nuovamente ordinata;
• più di 10.000 CFU – positivi.

Il medico inserisce un segno "+" o "-" sul modulo con un elenco di agenti patogeni di fronte a ciascuna posizione. Se il risultato è positivo viene immediatamente eseguito un antibiogramma. Mostrerà quale antibiotico dovrebbe essere usato per il trattamento.

Una procedura in cui viene eseguita un'urinocoltura viene prescritta se si sospetta un'infezione del sistema urinario. Un esame generale delle urine non rivelerà la batteriuria; ecco perché viene prelevato del liquido per l'esame batteriologico. È importante raccogliere correttamente i campioni, altrimenti i risultati saranno inaffidabili. Il risultato richiede circa una settimana per essere preparato.

Perché vengono testati?

La coltura batteriologica delle urine per la ricerca della microflora patogena è necessaria per i pazienti che sospettano infezioni del tratto urinario. Un'analisi generale delle urine mostra lo sviluppo dell'infiammazione nel corpo, ma tale esame non è in grado di identificare l'agente patogeno. L'urinocoltura non solo rivela il tipo di agente patogeno, ma determina anche il grado di suscettibilità ai farmaci antimicrobici.

Ci vorranno diversi giorni per decifrare i risultati dello studio. Ma nonostante questo significativo svantaggio, viene effettuata un'analisi in modo che il trattamento venga selezionato adeguatamente.

Un campione per l'analisi viene prelevato e posto in un ambiente speciale dove, in condizioni favorevoli, inizierà la rapida crescita e riproduzione dei microrganismi patogeni. Il tecnico di laboratorio determina i tipi di batteri e quindi esegue un test di sensibilità a un tipo specifico di antibiotico. L'analisi batterica consente di identificare altri microrganismi opportunisti, compresi i funghi. Ci vorrà almeno una settimana per ottenere un risultato così dettagliato.

L'esame microbiologico delle urine non è prescritto come diagnosi preventiva. Il test viene effettuato quando sono presenti sintomi indicativi di una complicanza infettivo-batterica dell'apparato urinario. L'esame viene effettuato se sono presenti tali patologie:

• dolore al basso ventre e disfunzione urinaria;
• cambiamenti nel colore, trasparenza, odore e composizione dell'urina;
• progressione dei sintomi di intossicazione: febbre alta, mal di testa, nausea, vomito.

È imperativo fare il test, perché le donne incinte sono spesso preoccupate per le complicazioni infettive degli organi urinari. Spesso la malattia è asintomatica, ma questa condizione è ancora più pericolosa, perché in qualsiasi momento può peggiorare e influire negativamente sulla salute non solo della madre, ma anche del bambino.

Un campione per i batteri viene prelevato più volte durante il periodo della terapia antibatterica. Il risultato dell'analisi mostrerà quanto è efficace il trattamento e se è necessaria una correzione o una sostituzione del farmaco. Quando si scopre che un agente patogeno è resistente a un farmaco specifico, il medico cambia il farmaco e adegua il regime terapeutico.

Come raccogliere?

Per ottenere risultati diagnostici affidabili, è importante raccogliere correttamente l'urina per la coltura. La preparazione non richiede il seguire alcuna dieta o l'abbandono della dieta abituale. Ciò che mangi o bevi non influenzerà la composizione dei batteri nel corpo. Le regole di raccolta sono semplici, ma da esse dipenderanno l'accuratezza e l'affidabilità del risultato.

Regole di base

• Quando si raccolgono i campioni, è meglio abbandonare i contenitori domestici, perché non è sempre possibile raggiungerne l'assoluta sterilità. La farmacia vende un contenitore speciale, che è importante aprire durante la procedura di raccolta delle urine.
• Prima di raccogliere il fluido biologico, è necessario eseguire procedure igieniche. Lavare bene i genitali esterni con acqua pulita e tiepida e acqua saponata, quindi asciugarli con un asciugamano.
• La raccolta delle urine viene effettuata al mattino. Per la ricerca, avrai bisogno della porzione centrale e la prima e l'ultima verranno scaricate nella toilette. Il campione risultante viene coperto ermeticamente con un coperchio e posto in un luogo fresco e buio o in frigorifero.

Come donare l'urina per la coltura?

L'esame dell'urinocoltura deve essere consegnato al laboratorio entro e non oltre 1,5-2 ore dalla raccolta. È controindicato ignorare questo algoritmo, poiché dopo un periodo di tempo più lungo il campione perderà il suo contenuto informativo e il medico non sarà in grado di decifrare correttamente i risultati. Quando c'è la necessità di donare urine ed emocolture al SES (stazione sanitaria ed epidemiologica), è meglio chiarire l'algoritmo e la sequenza della procedura di raccolta, perché a volte le regole possono differire.

Quanto tempo devo aspettare per i risultati?

L'esame batteriologico delle urine non è una procedura rapida, quindi il paziente, dopo aver ricevuto un rinvio, dovrebbe cercare di raccogliere e inviare campioni il prima possibile. Dopo che il biomateriale raggiunge il laboratorio, la quantità necessaria di biomateriale viene prelevata e posta in un liquido specifico, dove avverrà il processo di crescita e riproduzione dell'agente patogeno nel corso di 3-5 giorni. Pertanto, sono necessari complessivamente almeno 5-7 giorni lavorativi per determinare il tipo di infezione e ottenere il risultato.

Nella pratica urologica, le infezioni del tratto urinario sono le malattie batteriche più comuni, il cui trattamento e diagnosi presentano le proprie difficoltà, molto spesso associate alla natura atipica dell'agente patogeno e alla sua resistenza alla terapia antibiotica.

Pertanto, secondo le moderne raccomandazioni mediche, l'urinocoltura è obbligatoria per diagnosticare e monitorare il decorso delle infezioni del tratto urinario nei soggetti ad alto rischio. In questo materiale vedremo cos'è l'urinocoltura, cosa mostra questa analisi e come prepararsi adeguatamente.

La coltura batteriologica (coltura batteriologica o esame batteriologico delle urine) per la presenza di microflora patologica è un'analisi microbiologica altamente accurata che consente non solo di isolare e identificare l'agente eziologico dell'infezione urinaria, ma anche di determinarne l'esatta concentrazione (grado di batteriuria) , così come il grado di sensibilità ai gruppi più importanti di agenti antibatterici.

La ricerca consente:

1. 1 Identificare l'agente eziologico dell'infezione;
2. 2 Determinarne il titolo diagnostico in 1 ml di urina;
3. 3 Identificare la presenza di resistenza agli antibiotici (resistenza o sensibilità agli antibiotici);
4. 4 Monitorare la diminuzione del titolo del patogeno durante la terapia;
5. 5 Selezionare i farmaci antibatterici più efficaci per il trattamento;
6. 6 Monitorare la prevalenza di ceppi di microrganismi resistenti agli antibiotici nella popolazione.

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  1. Indicazioni per l'esame batteriologico delle urine

  Gli obiettivi principali dell'analisi perseguiti dal medico curante quando prescrive l'urinocoltura sono la diagnosi e il monitoraggio delle infezioni batteriche delle vie urinarie, nonché la determinazione della sensibilità dell'agente patogeno alla terapia antibiotica.

  Talvolta l'esame batteriologico (coltura batteriologica) delle urine viene utilizzato come screening per la prevenzione delle malattie infiammatorie delle vie urinarie nelle persone ad alto rischio (donne incinte, anziani, pazienti con diabete mellito). L'indicazione principale per l'urinocoltura è la presenza di sintomi di infezione urinaria.

  Tuttavia, secondo le raccomandazioni urologiche russe, se il paziente ha un'infezione urinaria non complicata, nonché in assenza di malattie concomitanti, la terapia antibatterica può essere prescritta empiricamente, senza prima identificare l'agente patogeno. La prescrizione empirica di antibiotici ottiene un effetto positivo in circa il 75-80% dei casi.

  Le indicazioni assolute per l'esecuzione del test della microflora urinaria sono:

  1. 1 Infezioni delle vie urinarie nelle donne in gravidanza;
  2. 2 Sospetto che il paziente abbia pielonefrite;
  3. 3 Tutti i casi di infezione delle vie urinarie negli uomini;
  4. 4 Focolai di infezioni urologiche acquisite in ospedale;
  5. 5 Febbre durante cateterizzazione prolungata della vescica, nonché sospetto di infezione urologica associata a manipolazione medica (cistoscopia, cateterizzazione);
  6. 6 Febbre superiore a 38 C senza motivo apparente nei bambini di età inferiore a 3 anni;
  7. 7 Infezioni urinarie ricorrenti, inefficacia della terapia antimicrobica empirica precedentemente condotta;
  8. 8 Infezioni urinarie complicate di età superiore a 65 anni;
  9. 9 La comparsa di sintomi di infezione urologica in persone con compromissione dello stato immunitario, malattia renale cronica, diabete mellito, anomalie congenite della struttura dei reni e degli ureteri, dopo trapianto di rene;
  10. 10 Negli ultimi tre mesi il paziente aveva assunto farmaci antibatterici che teoricamente avrebbero potuto portare alla formazione di forme resistenti di agenti patogeni.
  1. 1 Donne durante la gravidanza, dopo 14 settimane, anche in assenza di sintomi di patologia, che riduce il rischio di sviluppare pielonefrite nelle donne in gravidanza;
  2. 2 Pazienti con intervento chirurgico programmato sugli organi del sistema urinario;
  3. 3 Pazienti sottoposti a trapianto di rene nei primi due mesi dopo l'intervento chirurgico e successivamente con qualsiasi deterioramento del funzionamento dell'organo trapiantato.

  2. Regole per la raccolta del materiale

  Discuteremo di seguito come eseguire correttamente un test dell'urinocoltura durante la gravidanza, negli adulti e nei bambini. Per garantire l'accuratezza della diagnosi di laboratorio dell'infezione urologica, è importante rispettare tutte le fasi della diagnosi, inclusa la parte preanalitica: la raccolta dei campioni di urina e la loro consegna.

  È la necessità di determinare la quantità esatta di agenti batterici nel campione da analizzare che impone requisiti particolari alla raccolta dei campioni.

  Quando si conduce una ricerca in ambiente ospedaliero, il personale infermieristico dell'ospedale è responsabile della preparazione del paziente, della raccolta del materiale e del trasporto dello stesso al laboratorio. Per questi casi, i laboratori hanno istruzioni scritte che regolano tutte le fasi diagnostiche.

  Durante l'esame ambulatoriale, il paziente raccoglie l'urina in modo indipendente, senza la supervisione di un medico. In relazione a quanto sopra, è necessario istruire attentamente il paziente sulla tecnica di raccolta indipendente del materiale da testare al fine di evitare risultati errati dell'analisi.

  1. 1 La raccolta delle urine deve essere effettuata in un contenitore sterile monouso appositamente predisposto per questo scopo, acquistabile presso la catena di farmacie. Non è consentito raccogliere l'urina in contenitori, barattoli o bottiglie non sterili, già utilizzati;
  2. 2 Se possibile, la raccolta delle urine dovrebbe essere effettuata prima di iniziare i farmaci antibatterici o negli intervalli tra i cicli farmacologici, per evitare distorsioni delle informazioni ricevute;
  3. 3 Lo studio più affidabile è il campione medio di urina mattutina - dopo una notte di sonno e prima di colazione;
  4. 4 La sera, alla vigilia della raccolta delle urine, si consiglia, se possibile, di astenersi dall'assumere diuretici, poiché quando vengono assunti l'urina viene diluita e il numero totale di batteri in un millilitro diminuisce;
  5. 5 Per raccogliere l'urina dei neonati è opportuno utilizzare appositi orinatoi per bambini dotati di adesivo ipoallergenico; il campione raccolto viene successivamente versato in un contenitore per la raccolta delle urine, etichettato e trasportato in laboratorio.

  

  Figura 1 - Contenitori sterili per la raccolta delle urine per analisi (senza spatola)

  3. Principali fasi dell'autoraccolta delle urine

  La procedura di raccolta delle urine descritta di seguito viene utilizzata per tutti gli adulti, comprese le donne in gravidanza. Il volume ottimale di urina per l'analisi microbiologica è di circa 10-20 ml e il volume minimo non deve essere inferiore a 1 ml.

  Le fasi della raccolta indipendente del materiale di ricerca possono essere presentate come segue:

  1. 1 Lavarsi accuratamente le mani con acqua e sapone e asciugarle con un asciugamano pulito (preferibilmente usa e getta);
  2. 2 Lavare i genitali esterni con acqua tiepida e sapone, senza utilizzare antisettici per la pelle, asciugare la zona inguinale con un tovagliolo pulito usa e getta;
  3. 3 Aprire il contenitore sterile precedentemente preparato, evitando di toccarne le superfici interne con le dita;
  4. 4 Rilasciare la prima porzione di urina, interrompere la minzione;
  5. 5 Raccogliere la porzione successiva (media) in un contenitore sterile preparato, senza toccare la pelle nella zona inguinale con il contenitore;
  6. 6 Finire di urinare nella toilette;
  7. 7 Chiudere bene il coperchio del contenitore pieno, firmarlo, attaccare la direzione per l'analisi al contenitore con un elastico sottile e consegnarlo al laboratorio.

  È inaccettabile utilizzare l'urina della padella e l'urina delle donne durante le mestruazioni per la ricerca microbiologica.

  Come raccogliere correttamente l'urina per la coltura batterica da un bambino?

  1. 1 Dare da bere al bambino acqua tiepida o altro liquido (si può dare al bambino allattandolo al seno);
  2. 2 Lavarsi le mani con acqua saponata e asciugarle con un asciugamano pulito;
  3. 3 Lavare i genitali esterni del bambino;
  4. 4 Se possibile, raccogliere una porzione media di urina facendo sedere il bambino sulle ginocchia dell'assistente. Se non è possibile raccogliere la porzione centrale, è possibile utilizzare un orinatoio per bambini appositamente studiato, da controllare almeno ogni 10 minuti.
  5. 5 L'urina del contenitore non può essere utilizzata per l'analisi.

  

  Figura 2 – Raccolta dell'urina di un neonato in una sacca per urina sterile

  4. Regole per la consegna del materiale al laboratorio

  Le condizioni in cui un campione di urina viene consegnato al laboratorio hanno un impatto diretto sull'accuratezza dell'esame batteriologico, poiché possono sia ridurre la vitalità che stimolare la crescita dei batteri nel campione di urina presentato.

  Il campione deve essere consegnato al laboratorio entro e non oltre due ore dalla raccolta. Il periodo ottimale per l'inoculazione dei campioni di urina è inferiore a 30 minuti dopo la minzione, tuttavia, a causa della difficoltà di implementare questa condizione, questo periodo in molti laboratori è regolato a 1-2 ore.

  In caso di impossibilità di consegna entro il termine indicato, è consentito conservare il materiale a una temperatura non superiore a +40°C per 24 ore dal momento del ritiro. È vietato congelare un campione di urina: ciò porta alla morte di alcuni tipi di microrganismi.

  Per migliorare la qualità dello studio e garantire una conservazione più lunga, è consentito l'uso di stabilizzanti speciali, ad esempio acido borico all'1%. Tuttavia, l'aggiunta di tali conservanti è consentita solo nella misura strettamente consentita.

  A questo proposito, quando si esegue l'esame batteriologico delle urine, è consigliabile utilizzare sistemi di trasporto commerciali (provette speciali), in cui si ottiene una certa concentrazione di conservante aggiungendo una certa quantità di urina.

  Se sono disponibili sistemi di test speciali, è possibile eseguire una coltura batterica espressa senza lasciare il letto del paziente (strisce reattive Diaslide, Deepstreak), ma questo non è comune in Russia a causa dell'elevato costo delle apparecchiature.

  Tutti i campioni di urina ricevuti dal laboratorio devono essere etichettati dall'assistente di laboratorio in qualsiasi modo disponibile, consentendo di identificare con precisione un campione da un altro.

  Non sono ammessi alla ricerca:

  1. 1 Campioni di urina senza etichetta o indicazioni;
  2. 2 Campioni senza indicazione della data, ora e modalità del prelievo;
  3. 3 Immagazzinato per più di 24 ore dalla consegna;
  4. 4 Se l'integrità del contenitore di raccolta è danneggiata;
  5. 5 Campioni versati e aperti.

  5. Tecnica

  I laboratori russi eseguono test sulla microflora delle urine in conformità con l'ordinanza del Ministero della Salute n. 535 del 22 aprile 1985 "SULL'UNIFICAZIONE DEI METODI DI RICERCA MICROBIOLOGICA (BATTERIOLOGICA) UTILIZZATI NEI LABORATORI CLINICI E DIAGNOSTICI DELLE ISTITUZIONI DI TRATTAMENTO E DI PREVENZIONE"

  Negli ultimi anni l'ordinanza è stata più volte integrata e aggiornata.

  Un batteriologo e un assistente di laboratorio (assistente di laboratorio paramedico) sono coinvolti nell'esecuzione della coltura batteriologica. Le responsabilità del medico includono il monitoraggio della tecnologia dello studio e l'esecuzione diretta di tutte le fasi necessarie della diagnosi.

  L'assistente di laboratorio è responsabile della ricezione dei campioni di urina in arrivo, della preparazione dei documenti di accompagnamento, della preparazione dei mezzi diagnostici e dei reagenti necessari, della coltivazione delle colture, del conteggio quantitativo delle colonie batteriche cresciute, della distruzione dei materiali di consumo e dei residui dei campioni.

  Per la semina vengono utilizzati diversi tipi di terreni nutritivi:

  1. 1 Universale (agar sangue, CLED) – supporta la crescita di microrganismi sia gram-positivi che gram-negativi;
  2. 2 Diagnostica differenziale (cromogenica) – utilizzata per la differenziazione degli uropatogeni, cambiando colore al contatto con i prodotti della loro attività vitale;
  3. 3 Selettivo (Columbia agar, Endo agar, MacConkey): consente di coltivare separatamente agenti patogeni gram-positivi e gram-negativi.

  L'acquisizione di terreni nutritivi per la coltivazione di agenti patogeni avviene in forma già pronta o sotto forma di miscele secche specializzate per l'auto-preparazione. Per gli impasti secchi sono necessarie istruzioni che regolino con precisione tutte le fasi della preparazione.

  Per ottenere il risultato della coltura batterica dell'urina utilizzando un metodo non settoriale, un certo volume del materiale da testare viene applicato su una capsula Petri riempita con un terreno non selettivo (in questo caso, esattamente 1 µl di urina). Quindi una speciale ansa microbiologica, tarata al volume appropriato, viene immersa nel campione in esame.

  Il materiale è distribuito sulla superficie nella zona centrale sotto forma di più linee rette e poi di tratti orizzontali perpendicolari ad esse.

  

  Figura 3 - Coltura di urina, applicazione del materiale a un mezzo nutritivo in una capsula Petri

  Quando si utilizza il metodo di semina a settori, la capsula Petri è pre-divisa in 4 settori uguali, contrassegnati da lettere dell'alfabeto. Un'ansa sterile viene utilizzata per inoculare l'urina in una quantità di 0,005 ml, alternativamente in quattro settori. Quando si passa al settore successivo, il loop viene prima bruciato.

  La coltura dell'urina su terreni non selettivi consente la coltura quantitativa, mentre i terreni selettivi vengono utilizzati per ottenere colonie isolate e la determinazione primaria del microrganismo, quindi l'urina non viene applicata su di esse in modo uniforme.

  Le piastre Petri vengono conservate in un termostato a una temperatura di 35-37 per 18-24 ore, dopodiché viene calcolato il risultato. In alcuni casi (scarsa crescita della flora, discrepanza tra il risultato e il quadro clinico, sospetto della presenza di funghi, ecc.), l'incubazione può essere prolungata fino a 2 giorni.

  Quando viene rilevata la crescita batterica, utilizzando apposite tabelle, vengono presi in considerazione tutti i tipi di colonie coltivate e viene valutata anche la loro possibile patogenicità.

  Quando vengono rilevati probabili uropatogeni, vengono ulteriormente identificati studiando le proprietà culturali, biochimiche, tintoriali e agglutinanti e viene determinato il grado della loro sensibilità ai farmaci antimicrobici.

  6. Determinazione della sensibilità antibatterica

  La determinazione della sensibilità degli uropatogeni agli antibiotici viene effettuata utilizzando uno dei tre metodi raccomandati dal Comitato europeo per la resistenza agli antibiotici:

  1. 1 Con il metodo del disco: una sospensione di batteri di densità predeterminata viene applicata sulla superficie dell'agar in una capsula Petri, quindi vengono posti sopra dei dischi contenenti una certa concentrazione di antibiotico, il che porta alla comparsa di una zona di inibizione di crescita batterica, il cui diametro serve per giudicare la sensibilità del microrganismo e determinare la concentrazione minima inibente del farmaco;
  2. 2 E-test a diffusione gradiente - il metodo è simile al test del disco, ma al posto dei dischetti antibatterici vengono utilizzate strisce E-test contenenti un gradiente di concentrazione dell'antibiotico dal minimo al massimo. In questo caso viene determinata anche la concentrazione minima inibente del farmaco;
  3. 3 Utilizzando il metodo della diluizione seriale: l'antibiotico viene diluito in diverse concentrazioni precedentemente note e quindi introdotto nell'agar per la coltivazione dei batteri. Il grado di soppressione della crescita batterica può essere utilizzato anche per giudicare la presenza o l'assenza di sensibilità all'antibiotico.

  7. Interpretazione dei risultati

  Quando si decifra il risultato dell'urinocoltura, è necessario tenere conto della gravità delle manifestazioni cliniche dell'infezione urologica, del rispetto del metodo di raccolta del materiale e delle regole per il trasporto e la conservazione dei campioni.

  Tutti i tipi di infezioni urologiche possono essere suddivisi in mono e misti, che si verificano con il rilascio di un massimo di due tipi di agenti patogeni.

  Se nel materiale del test vengono rilevati tre o più agenti patogeni, la situazione è considerata un segno di contaminazione accidentale (contaminazione) del campione di urina. In questo caso, si consiglia di ripetere lo studio rispettando tutte le fasi del campionamento e della diagnosi.

  Attualmente, tutti i batteri presenti nel tratto urinario sono generalmente divisi in tre gruppi, il che influisce sul loro titolo diagnostico minimamente significativo (quando si inocula 1 μl):

  • Patogeni primari (Escherichia coli, Salmonella, Micobatteri, Leptospira). Questi microrganismi sono patogeni obbligati, il loro titolo diagnostico minimamente significativo è superiore a 10x3 CFU/ml;
  • Agenti patogeni secondari (enterobatteriacee, Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae).

  Questi agenti patogeni sono patogeni solo in determinate condizioni: quando il sistema immunitario è indebolito, dopo procedure mediche invasive, con concomitanti condizioni croniche, il loro titolo diagnostico minimo è 10x4 CFU/ml;

  • Patogeni dubbi (stafilococchi coagulasi negativi, streptococco agalactia, acinetobacter, Pseudomonas spp, la loro concentrazione diagnostica minima è superiore a 10x5 CFU/ml.

  L'isolamento di rappresentanti della microflora normale, come difteroidi, gardnerella, streptococchi alfa-emolitici non è significativo dal punto di vista diagnostico.

  8. Ragioni per risultati falsi

  Uno dei motivi più significativi per la comparsa di risultati falsi dell'analisi batteriologica delle urine è il mancato rispetto della tecnologia di ricerca standardizzata, in particolare:

  1. 1 Aumentare la dose di semi del materiale di prova;
  2. 2 Mancato rispetto della durata del periodo preanalitico di conservazione delle urine;
  3. 3 Violazione degli standard di raccolta delle urine;
  4. 4 Mancanza di igiene dei genitali esterni prima della raccolta delle urine;
  5. 5 Raccolta delle urine in contenitori inappropriati;
  6. 6 Violazione delle condizioni di temperatura per lo stoccaggio e il trasporto;
  7. 7 Condurre ricerche durante la terapia antibiotica o durante le mestruazioni nelle donne;
  8. 8 Non rispetto del tempo di permanenza del materiale nel termostato.

Per identificare molte infezioni batteriche nascoste che si verificano durante la gravidanza, viene esaminata l'urinocoltura. Questo studio viene effettuato abbastanza spesso in ginecologia. Questo articolo aiuterà le future mamme a capire quando viene prescritta l'urinocoltura e come prepararsi adeguatamente.

In quali casi viene effettuato?

È possibile identificare gli agenti causali di varie infezioni del tratto urinario e dei reni solo attraverso l'esame batteriologico delle urine. Questa analisi viene attualmente eseguita in quasi tutti i laboratori. Puoi donare l'urina per tale studio sia in una normale clinica ginecologica che in un centro medico privato.

Il pericolo di infezione del feto da parte dei microbi è piuttosto elevato. I batteri, essendo di dimensioni piuttosto ridotte, penetrano perfettamente nella barriera placentare. Entrando nel flusso sanguigno sistemico del feto, possono portare allo sviluppo di varie condizioni patologiche. L'esame delle urine in questo caso consente di identificare tali agenti patogeni in un tempo abbastanza breve.

Questo studio può essere prescritto alle future mamme che hanno varie malattie degli organi urinari e dei reni.

In questo caso non è affatto necessario che queste patologie si manifestino nella fase acuta. In alcune situazioni, anche la pielonefrite latente può manifestarsi come cambiamenti caratteristici nell'analisi generale e nell'urinocoltura. In questo caso, di norma, è necessario prescrivere farmaci urologici speciali per correggere i disturbi risultanti.

Anche con il corso fisiologico della gravidanza che si verifica senza varie anomalie, i medici possono prescrivere questo studio due volte. Sono necessari per escludere tutte le patologie “silenti” che possono portare allo sviluppo di varie condizioni patologiche nel feto. Di solito questo l'esame viene effettuato a 9-12 e 35-36 settimane gravidanza.

Se una donna incinta soffre di diabete mellito da molto tempo, soprattutto se si manifesta con un livello di zucchero nel sangue costantemente elevato, in questo caso potrebbe anche essere necessario condurre un esame batteriologico delle urine. L’iperglicemia persistente può causare danni al tessuto renale. Questa condizione è estremamente sfavorevole, soprattutto durante la gravidanza.

Una coltura in vasca può anche essere prescritta da un medico se, durante lo screening, sono state rilevate proteine ​​nelle urine di una donna incinta. In questa situazione, è imperativo escludere la pielonefrite cronica dalla futura mamma, che si manifesta senza segni clinici pronunciati.

Se una donna incinta avesse l'urolitiasi prima del concepimento, in questo caso non sarebbe superfluo condurre una coltura batterica. Questa malattia è spesso accompagnata da infiammazione del tessuto renale e delle vie urinarie. Una complicazione di questa condizione è la comparsa di vari microbi patogeni nelle urine. Questo può essere facilmente determinato eseguendo un esame batteriologico su una donna incinta.

Il verificarsi di un forte dolore improvviso nella parte bassa della schiena, un aumento della temperatura corporea a livelli febbrili, lo sviluppo di un grave edema sul corpo: tutti questi sintomi richiedono anche una gamma più ampia di diagnosi. Comprende anche la semina batterica. Molto spesso, questi sintomi sfavorevoli sono una conseguenza dell'esacerbazione della pielonefrite. In una situazione del genere è necessaria una consultazione urgente con un urologo e la prescrizione di farmaci uroseptici che possono essere utilizzati durante la gravidanza.

Come raccogliere correttamente l'urina?

Prima di sottoporre un'analisi batteriologica, è molto importante seguire alcune regole di base. Sono necessari per garantire che il risultato della ricerca effettuata sia quanto più informativo possibile. In genere, i ginecologi danno piccole istruzioni e raccomandazioni alle donne incinte che vengono a trovarli su come raccogliere correttamente l'urina per l'esame.

La cena prima della procedura di raccolta delle urine dovrebbe essere il più leggera possibile. Non dovresti mangiare troppo cibi grassi, fritti o eccessivamente salati. Questi alimenti potrebbero rendere imprecisi i risultati del test.

Prima di assumere la coltura batterica, qualsiasi attività fisica dovrebbe essere evitata. È consentito solo camminare a passo lento. È meglio posticipare le lezioni di yoga per le donne incinte, salire più scale contemporaneamente o pulire l'appartamento fino a dopo la procedura.

Alla vigilia dello studio, se possibile, dovresti limitare l'assunzione di diuretici (diuretici). Prima di farlo, devi assicurati di consultare il tuo medico. In alcune situazioni ciò non è possibile perché potrebbero verificarsi conseguenze spiacevoli. Tuttavia, l’assunzione di diuretici può far sì che il risultato del test sia alquanto impreciso.

Il regime di consumo rimane lo stesso prima della coltura batterica. Le donne incinte che intendono sottoporsi al test non dovrebbero limitare l'assunzione di liquidi.

L'eccezione sono le donne che soffrono di edema grave e gestosi. In questo caso, l'assunzione di liquidi deve essere rigorosamente dosata.

L'igiene dei genitali esterni è un importante punto di preparazione prima di tale analisi. Va ricordato che durante la raccolta del materiale per la semina batterica, il rispetto delle norme igieniche gioca un ruolo significativo.

Prima di raccogliere il liquido, assicurati di risciacquare accuratamente i genitali esterni.. Questo può essere fatto con acqua calda corrente regolare. Non dovresti far bollire l'acqua o usare antisettici speciali prima di raccogliere un test delle urine per la coltura batterica. Dopo aver lavato i genitali, tamponateli delicatamente con un asciugamano pulito e stirato.

L'urina deve essere raccolta per il test al mattino. I medici di solito consigliano di farlo immediatamente dopo il risveglio. Il contenitore in cui verrà raccolta l'urina dovrebbe essere il più pulito possibile. Se è possibile utilizzare un contenitore sterile, questo sarà un grande successo. Di norma, tali contenitori vengono utilizzati solo negli ospedali.

Attualmente le farmacie vendono speciali contenitori di plastica in cui è possibile raccogliere l'urina per i test. Si avvitano tramite un tappo speciale. Ciò consente di evitare che il liquido raccolto possa fuoriuscire durante il trasporto al laboratorio o che altri microbi provenienti dall'ambiente possano penetrarvi.

Molte madri portano l'urina raccolta in un barattolo di vetro per alimenti per bambini per l'analisi. Questo contenitore non è adatto alla raccolta di batteri. Ciò è spiegato dalla pessima qualità della lavorazione dei piatti. Residui microscopici di cibo lasciati sulle pareti di un barattolo di questo tipo possono portare a risultati inaffidabili dopo il test.

Una porzione media dovrebbe essere raccolta per la ricerca. Per fare questo, devi prima urinare nella toilette. Questo tipo di minzione è chiamata minzione primaria. Solitamente bastano 2-3 secondi per superare la prima porzione. Allo stesso tempo, viene raccolto per l'esame il seguente volume di fluido secreto. Solitamente per l'analisi sono necessari circa 80 ml.

Il prossimo passo molto importante è trasportare l'analisi in laboratorio. Questo dovrebbe essere fatto 1,5-2 ore dopo la raccolta materiale biologico. Tempi di trasporto più lunghi renderanno imprecisi i risultati ottenuti.

Nell'ambiente ospedaliero di un istituto medico vengono eseguiti anche metodi invasivi per la raccolta delle urine. Includono la puntura sovrapubica e il cateterismo. Questi metodi sono piuttosto traumatici e dovrebbero essere eseguiti solo da specialisti esperti.

Una tecnica errata per eseguire questi studi può causare varie lesioni. Di solito, l'analisi viene raccolta in questo modo solo in situazioni in cui è impossibile raccogliere l'urina per l'esame nel modo consueto. Di norma, questi casi si verificano con varie lesioni precedenti all'uretra.

Decodifica

Molto spesso, i medici cercano di rilevare vari tipi di stafilococchi, streptococchi, microrganismi anaerobici e flora fungina. In genere, questi agenti patogeni sono abbastanza ben identificati mediante urinocoltura. Esistono alcuni standard che si applicano durante i diversi periodi della gravidanza. Il medico curante ti aiuterà a decifrare l'analisi.

Di norma, il risultato della coltura batterica viene valutato utilizzando “+” e “-”. Questi segni sono posizionati accanto a ciascun tipo di microrganismo studiato. Indicano la loro presenza o assenza nel campione risultante. Un'alta concentrazione di microbi può essere espressa in due o tre più. In questo caso, i medici dicono che questo test è positivo per identificare un certo tipo di batteri.

Il segno “-” indica che questi microbi non sono stati rilevati nel campione risultante. Questo tipo di analisi è chiamata negativa.

Per quantificare, i medici utilizzano speciali unità di misura chiamate unità formanti colonie o CFU. Sono calcolati per 1 ml del liquido di prova. Gli scienziati ritengono che 1 CFU sia un microrganismo che ha contribuito alla comparsa di una grande colonia.

I risultati vengono valutati utilizzando calcoli quantitativi. Quindi, 1000-10000 CFU/ml indica che il risultato dell'analisi è discutibile. In questo caso, i medici di solito raccomandano alla donna incinta di ripetere questo test di laboratorio.

Meno di 1000 CFU indica che non sono presenti anomalie patologiche nel campione presentato. Tali test si verificano durante la gravidanza senza complicazioni, nonché in situazioni in cui la futura mamma non presenta segni di malattie dei reni o delle vie urinarie.

Un aumento superiore a 10.000 CFU/ml è solitamente un segnale sfavorevole. Questa situazione si sviluppa in presenza di infezioni delle vie urinarie o di diverse patologie renali. In questo caso sono necessari metodi diagnostici ausiliari aggiuntivi più dettagliati. Inoltre, in una situazione del genere, una donna incinta deve essere indirizzata a un urologo per un consulto.

L’analisi batteriologica gioca un ruolo enorme nella diagnosi del corpo del paziente. Questo test di laboratorio viene utilizzato dai professionisti medici per identificare un ceppo infettivo nel sistema urinario che causa infiammazione. Un serbatoio per l'urinocoltura consente inoltre di determinare il grado di sensibilità dei microrganismi patogeni agli effetti dei farmaci.

Se un paziente lamenta un malfunzionamento del sistema urinario, il medico dovrà scoprire la vera causa dell'infiammazione, la concentrazione di sostanze patogene in presenza di un'eziologia infettiva, per formulare una diagnosi definitiva. Per decidere sulla scelta di un antibiotico di base, sarà necessario condurre un'analisi della sensibilità degli agenti patogeni alla sua azione.

È importante sapere come donare un'urinocoltura ad un acquario, poiché la chiave per ottenere un risultato affidabile è un'adeguata preparazione alla manipolazione. Un'indicazione medica per prescrivere questo test è la presenza dei seguenti fattori:

• Nel primo trimestre di gravidanza e immediatamente prima del parto, un test batteriologico è uno studio preventivo obbligatorio. Una donna potrebbe non provare disagio, ma la microflora patogena identificata durante la diagnosi rappresenta una potenziale minaccia per la madre e il bambino a causa dell'infezione del canale del parto.
• Nella pratica medica ci sono situazioni in cui il trattamento non mostra dinamiche positive, il che potrebbe indicare che i batteri si sono adattati agli effetti dei farmaci. I risultati della coltura batterica delle urine consentono al medico curante di riconsiderare le tattiche di trattamento e selezionare il farmaco battericida più efficace.
• Il decorso cronico di pielonefrite, cistite, uretrite è causato dalla presenza a lungo termine nel corpo del paziente di gram (+) e gram (-): stafilococco, candida, gonococco, enterococco. Le donne, a causa della specifica struttura anatomica del sistema genito-urinario, sono più suscettibili alle malattie infettive e infiammatorie. Per questo motivo, nella prima fase della diagnosi e dopo la terapia per confermare la completa distruzione di batteri e microbi, è necessaria la donazione dell'urina in una vasca di coltura. Questo è l'unico modo per eliminare la possibilità di un'epidemia ricorrente della malattia.
• Nelle situazioni in cui un paziente ha il diabete, è necessario sottoporre periodicamente il biomateriale all'esame batteriologico. L'urina contiene zucchero, che costituisce un ambiente favorevole alla proliferazione della microflora patogena.

Regole per la preparazione alla raccolta del biomateriale per l'analisi

Quando si riceve una richiesta per un'urinocoltura, è importante scoprire come inviarla. Per l'analisi sarà necessario raccogliere l'urina mattutina media, che viene presentata al laboratorio esclusivamente in contenitori sterili. È abbastanza difficile preparare da soli un contenitore a casa, quindi puoi acquistare barattoli di plastica usa e getta per la ricerca in farmacia.

È necessario superare la coltura batterica rispettando le seguenti regole:

• Il giorno prima dell'analisi, i medici consigliano di adeguare la dieta escludendo cibi affumicati, cibi salati e fritti e bevande alcoliche.
• Nelle situazioni in cui un paziente con malattie concomitanti deve assumere costantemente farmaci, lo specialista deve essere avvisato in anticipo.
• L'urina per la coltura viene raccolta al mattino, dopo aver lavato accuratamente i genitali con prodotti a pH neutro. Puoi usare la tua soluzione di furacilina preparata. Per fare questo, schiacciare una compressa e aggiungere 500 ml di acqua bollita. Dopo il completo raffreddamento, la soluzione risultante viene utilizzata per risciacquare i genitali.
• Spesso sorge la domanda su come raccogliere correttamente una porzione media di urina. Per fare ciò, è necessario scaricare la prima parte nella toilette, poiché scarica l'uretra, in cui si accumulano microrganismi patogeni. La porzione successiva viene raccolta in un contenitore sterile. Se questa condizione viene soddisfatta, i batteri non entreranno nel biomateriale e il risultato della semina batterica sarà corretto.
• L'urina raccolta deve essere inviata ad un laboratorio diagnostico entro due ore per ottenere dati affidabili.
• Durante il ciclo mestruale, le donne non vengono sottoposte ad analisi batteriologiche, poiché le impurità presenti nel sangue interrompono il quadro generale della microflora vaginale.
• Si consiglia di astenersi dai rapporti sessuali prima di sottoporsi ad un test di laboratorio.

Interpretazione dei risultati dei test di laboratorio ottenuti

Il biomateriale raccolto dal paziente viene esaminato in laboratorio per 7 giorni. Per fare ciò, viene posto in condizioni in cui inizia la crescita attiva dei microrganismi batterici. Come ambiente favorevole, gli assistenti di laboratorio utilizzano una soluzione vegetale dei loro liquidi Agar-Agar (alghe), sale lattiero-caseario o tio-glicole. La presenza di colonie batteriche è indicata in unità speciali - CFU/ml.

In assenza di crescita di microrganismi patogeni in una concentrazione fino a 1000 CFU per 1 ml di urina, il risultato della coltura è considerato negativo, il che significa che non si verificano processi infiammatori nel sistema urinario del paziente.

Pertanto, se l'indicatore viene superato (centinaia di volte più di 1000 CFU/ml), si parla di risultato positivo del test. In queste situazioni, gli assistenti di laboratorio conducono ulteriori analisi del biomateriale per identificare la sensibilità individuale ai farmaci antibatterici.

Se si ottengono risultati intermedi della decifrazione dell'urinocoltura, il farmaco può essere prescritto nuovamente. Nella pratica medica si verificano spesso situazioni in cui i valori CFU oscillano fino a 1000. Ciò può essere associato alla fase iniziale di una malattia infettiva-infiammatoria. Per fare una diagnosi definitiva, i medici indirizzano il paziente a sottoporsi nuovamente all’urinocoltura.

Il risultato finale dell'analisi batteriologica elenca tutti i microrganismi identificati e i farmaci ai quali hanno una maggiore sensibilità. Solo sulla base di questi dati il ​​medico curante elabora un piano terapeutico.

Conclusione

La maggior parte degli agenti patogeni entrano nelle urine durante il processo di escrezione dei liquidi da parte dei reni attraverso il canale uretrale. Normalmente è consentita una piccola concentrazione di batteri nella microflora e non rappresenta una potenziale minaccia per la salute umana. La coltura batterica è uno degli studi più informativi che ci consente di identificare un tipo specifico di agente patogeno.

Il superamento degli indicatori CFU standard costituisce una prova evidente della presenza di un processo infettivo-infiammatorio nel sistema urinario.

Ci sono situazioni in cui compaiono errori nell'analisi batteriologica. Per ottenere il risultato corretto, i pazienti devono prima imparare a raccogliere l'urina per la coltura. Quando si scelgono farmaci antibatterici efficaci, il medico curante si affida alla valutazione dell'analisi dei biomateriali del paziente. Solo con un approccio così responsabile alla terapia è possibile ottenere un recupero completo ed eliminare la probabilità di una ricaduta della malattia.